In welke stap in pcr is een thermostabiel enzym nodig?

Inhoudsopgave:

In welke stap in pcr is een thermostabiel enzym nodig?
In welke stap in pcr is een thermostabiel enzym nodig?

Video: In welke stap in pcr is een thermostabiel enzym nodig?

Video: In welke stap in pcr is een thermostabiel enzym nodig?
Video: PCR (Polymerase Chain Reaction) 2024, Maart
Anonim

Taq-polymerase Net als DNA-replicatie in een organisme, vereist PCR een DNA-polymerase-enzym dat nieuwe DNA-strengen maakt, waarbij bestaande strengen als sjablonen worden gebruikt. Het DNA-polymerase dat doorgaans bij PCR wordt gebruikt, wordt Taq-polymerase genoemd, naar de hittetolerante bacterie waaruit het werd geïsoleerd (Thermus aquaticus).

Waarom is een thermostabiel DNA-polymerase vereist voor PCR?

aquaticus is een bacterie die leeft in warmwaterbronnen en hydrothermale bronnen, en Taq-polymerase werd geïdentificeerd als een enzym dat bestand is tegen de eiwitdenaturerende omstandigheden (hoge temperatuur) die nodig zijn tijdens PCR.

Welke stap wordt gebruikt in PCR thermostabiel enzym?

Een thermostabiel DNA-polymerase wordt gebruikt in herhaalde cycli van primer-annealing, DNA-synthese en dissociatie van duplex-DNA om als nieuwe templates te dienen. De theoretische amplificatie van matrijs-DNA, aangenomen dat reagentia niet beperkend zijn en het enzym volledige activiteit behoudt, is 2 waarbij n het aantal cycli is.

In welke stappen van PCR-enzymen worden gebruikt?

Drie stappen van PCR─denaturatie, annealing en verlenging─zoals getoond in de eerste cyclus, en de exponentiële amplificatie van doel-DNA met herhaalde cycli.

Welk enzym wordt gebruikt voor amplificatie in PCR?

Taq DNA-polymerase wordt vaak gebruikt om PCR-producten van 5 kb of minder te amplificeren. PCR-producten in het bereik van 5-10 kb kunnen worden geamplificeerd met Taq-DNA-polymerase, maar vereisen vaak meer optimalisatie dan kleinere PCR-producten.

Aanbevolen: